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念珠菌顯色培養基根據酶底物法,通過顯色來區別不同念珠菌,30-35℃培養24-72小時后,白色念珠菌顯綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑制。
成份(g/L)
胨 | 10.2 |
氫罌素 | 0.2 |
色素 | 22.0 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 6.3±0.2 25℃ |
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得z佳的結果。
檢驗原理
蛋白胨提供碳氮源;瓊脂是培養基的凝固劑;抑制劑抑制雜菌的生長;色素對應的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團
用法
稱取本品 9.7g(可按 4.85g/100ml 的比例擴大或縮小),加入 200ml 蒸餾水或純化水中,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。將加熱后的培養基水浴冷卻至 45-50℃,輕輕地搖勻,傾入無菌平皿(9cm 的 15ml/皿,7cm 的 10ml/皿),瓊脂*凝固后,備用。
操作步驟
1、按中國藥典方法制備樣品液;
2、取樣品液接種至適宜的培養基上培養;
3、將疑似菌落接種至念珠菌顯色培養基平板上,30-35℃培養 24-72 小時。白色念珠菌典型特征為綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑制。
4、對可疑白色念珠菌菌落應進一步進行適宜的鑒定試驗。
質量控制
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈淡黃色透明固態。
2、微生物試驗
在 30-35℃ 培養 24-72 小時:
質控菌株 | ATCC | 生長情況 | 菌落顏色 |
白色念珠菌 | CMCC(F)98001 | +++ | 綠色 |
熱帶念珠菌 | ATCC13803 | +++ | 藍灰色 |
克柔假絲酵母菌 | ATCC14243 | +++ | 紫粉色 |
光滑念珠菌 | ATCC15126 | +++ | 淡紫色-紫色 |
其它念珠菌 | / | +++ | 白色 |
大腸埃希氏菌 | CMCC(B)44102 | - | 抑制 |
方法的局限性
本培養基鑒定白色念珠菌,少數情況下可能會出現假陽性或假陰性,需做其它補充試驗。
典型特征
白色念珠菌典型特征為綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑制。
貯存
制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干粉培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
念珠菌顯色培養基(1000ml)微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置25-30℃需氧培養48-72小時。
注:回收率計算時,用SDA瓊脂做對照培養基。
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